一、適用范圍
熒光探針法PCR試劑盒主要用于DNA分子的擴(kuò)增和檢測，適用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、環(huán)保、食品安全等領(lǐng)域的基因檢測和研究。
二、試劑盒組分
本試劑盒包括：TaqDNAPolymerase、核酸引物混合液、熒光探針、混合實(shí)時PCRbuffer、雜交探針引物等多種成分。
三、試劑盒儲存條件
試劑盒應(yīng)存放于4℃環(huán)境中，不可凍結(jié)，避免光照和日曬。
四、操作步驟
1、從樣本中提取DNA并加入PCR反應(yīng)管；
2、加入試劑盒中的TaqDNAPolymerase，核酸引物混合液和熒光探針；
3、加入混合實(shí)時PCRbuffer并充分混合；
4、進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并進(jìn)行實(shí)時熒光檢測；
5、數(shù)據(jù)分析。
五、注意事項(xiàng)
1、試劑盒使用前應(yīng)充分搖勻；
2、反應(yīng)體系中不能有任何雜質(zhì)；
3、PCR擴(kuò)增過程中應(yīng)嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度和時間，確保擴(kuò)增效果；
4、在檢測結(jié)果中，若目標(biāo)物對應(yīng)熒光探針的熒光值高于負(fù)對照熒光值，則可認(rèn)為該樣本中存在目標(biāo)物。
六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解釋
若PCR擴(kuò)增后，熒光信號強(qiáng)度大于背景噪聲，則說明目標(biāo)物存在，反之則說明不存在。根據(jù)樣品的熒光信號，可以通過計(jì)算閾值來判斷目標(biāo)物的數(shù)量。
七、質(zhì)量控制措施
為確保試劑盒質(zhì)量，本試劑盒的生產(chǎn)過程中進(jìn)行了多項(xiàng)質(zhì)量控制措施。例如在成分篩選、產(chǎn)品生產(chǎn)和包裝過程中不斷監(jiān)測，確保每一批次的產(chǎn)品品質(zhì)穩(wěn)定可靠。同時，每批產(chǎn)品在發(fā)貨前還會進(jìn)行校準(zhǔn)和功能測試，確保滿足客戶需求。
八、檢測限定及注意事項(xiàng)
為確保檢測準(zhǔn)確度，建議在每次檢測前使用模板對反應(yīng)體系進(jìn)行質(zhì)控。另外，在樣品處理、試劑配置、反應(yīng)條件控制等步驟中均需注意無菌操作，盡可能排除外源性污染。
